ИФА – это современный лабораторный метод диагностики, в ходе которого исследуется кровь на содержание в ней антител и антигенов. С помощью иммуноферментативного анализа определяют их количественный и качественный состав. Кроме этого, кровь на ИФА берут для определения уровня гормонов, наличия иммунологических комплексов и других биоактивных веществ.
Чаще всего метод используют для диагностики инфекционных, аутоиммунных, гематологических и других болезней.
В чем суть анализа?
Для исследования берут кровь из вены, содержимое стекловидного тела, спинномозговую жидкость, мазки, слизь уретры и цервикального канала. Во время беременности у женщин в случае необходимости могут взять и околоплодную жидкость. Кровь нужно сдавать натощак, за две недели до процедуры нужно прекратить любое специфическое лечение, например, прием антибиотиков, антивирусных и противопаразитарных препаратов.
>Исследование может проводиться несколькими способами:
- прямым,
- непрямым,
- конкурентным,
- блокированием.
Когда в организм попадает возбудитель болезни, который называют антигеном, иммунные клетки начинают производить антитела, чтобы уничтожить чужеродных агентов. Эти антитела, представляющие собой специфические белки, связываясь с антигенами, образуют иммунологические комплексы, которые называются антиген-антитело. Именно эти комплексы и исследуются во время проведения ИФА. Для выявления антигена в образец крови добавляют антитела против него, если же нужно определить наличие антител, добавляют антиген.
В основе ИФА лежит способность иммунных клеток распознавать антигены.
Анализ состоит из иммунной реакции и ферментативной. В результате первой происходит связывание болезнетворных агентов и элементов клеток организма. Ферментативная реакция позволяет визуализировать результат иммунной.
Текст-системы для ИФА-диагностики
Во время иммунной реакции происходит связывание антитела и антигена, в результате образуется иммунный комплекс. На поверхности всех клеток есть антиген. Иммунная клетка захватывает подозрительную клетку и сравнивает антиген на ее поверхности с имеющейся информацией в ее памяти. Если описание совпадает, иммунная клетка ее отпускает, если не совпадает, она связывается с чужеродной клеткой с помощью антитела, которое находится на ее поверхности и умеет определять «свой» это или «чужой». Так образуется иммунный комплекс, на помощь призываются другие антитела, и начинается уничтожение «врага».
Во время ферментативной реакции происходит превращение одного вещества в другое. На материал (субстрат) воздействуют ферментом, при этом для каждого конкретного субстрата есть свой фермент. Полученный продукт реакции исследуют на определение концентрации возбудителя, которая зависит от плотности окраски раствора.
Расшифровка
Эти антитела при инфицировании образуются не одновременно, а в разное время. Самыми первыми вырабатываются и накапливаются IgM – примерно на пятые сутки после начала болезни. Их можно обнаружить в течение полутора месяцев, пока они циркулируют в крови. Затем они начинают постепенно исчезать.
IgG появляются спустя четыре недели после заражения и могут задерживаться в крови до нескольких месяцев. Их рост может говорить о повторном инфицировании.
IgA содержатся преимущественно в секретах, например, слизистой оболочки. Только около 20% находится в крови, где они циркулируют до четырех недель. Их исчезновение происходит постепенно в течение месяца. Если IgA пошли на спад, значит, инфекционный процесс прекратился. Если они выявляются после выздоровления, это говорит о развитии хронического заболевания. После некоторых болезней антитела сохраняются очень долго, например, после гепатита B.
На основании анализа можно сделать следующие выводы:
- Если в крови не обнаружены антитела IgM, IgG и IgA, это говорит об отсутствии иммунного ответа.
- Присутствие иммуноглобулина IgM свидетельствует об остром первичном процессе, при его обнаружении требуется усиленное лечение.
- Если выявлен IgG или IgG и IgA, в организме происходит хронический процесс. Положительный IgG свидетельствует о каком-либо заболевании, перенесенном человеком в прошлом.
- Если присутствуют антитела IgM и IgG, вероятнее всего, началось обострение хронической болезни и необходимо лечение.
Для чего назначают?
Эту методику применяют в разных медицинских отраслях. Чаще всего она используется при диагностике таких патологий:
- инфекционные заболевания;
- злокачественные опухоли;
- сифилис;
- ИППП: трихомониаз, гонорея, микоплазмоз, хламидиоз, уреаплазма и другие;
- иммунодефицит;
- аллергии;
- эндокринные патологии;
- аутоиммунные процессы;
- нарушения в репродуктивной сфере;
- оценка возможного развития некоторых заболеваний: инфаркта, инсульта, почечных патологий, болезней нервной системы.
Из инфекционных заболеваний с помощью ИФА можно диагностировать следующие:
- все вирусные гепатиты;
- ВИЧ;
- герпес 1-го и 2-го типов;
- цитомегаловирусные инфекции;
- краснуху;
- токсоплазмоз;
- мононуклеоз;
- дизентерию;
- корь;
- сальмонеллез;
- бруцеллез;
- энцефалит;
- паразитарные инфекции: описторхоз, лямблиоз, токсокароз и другие.
Преимущества и недостатки
ИФА имеет немало преимуществ перед другими лабораторными исследованиями. Среди них:
- высокая специфичность;
- высокая чувствительность (около 90%);
- доступность, возможность проведения в лаборатории любого медицинского учреждения;
- низкая стоимость наборов для диагностики;
- удобство проведения;
- минимальные объемы исследуемого материала;
- быстрое получение результата;
- длительность хранения (до одного года) ингредиентов, необходимых для анализа;
- возможность определить классы иммуноглобулинов;
- возможность ранней диагностики;
- возможность определить причину и стадию заболевания;
- возможность следить за динамикой протекания инфекционного процесса.
К недостаткам можно отнести:
- редкие случаи ложноположительных (случается во время беременности) и ложноотрицательных результатов;
- невозможность определить возбудителя болезни, а лишь установить иммунный ответ на него.
Заключение
ИФА широко применяется в здравоохранении ввиду быстроты анализа, высокой чувствительности, возможности исследовать большое количество образцов без особой необходимости их предварительной очистки. Благодаря значительным преимуществам перед другими методами, без ИФА невозможно представить исследования в области биохимии, иммунологии, вирусологии, онкологии, микробиологии, клеточной физиологии.
